索玛鲁肽（Sermaglutide）是一种新型长效GLP-1受体激动剂，由丹麦诺和诺德公司开发。其肽序列为H-His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Eu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(Octadecanedioic-γ-Glu-PEG2-PEG2)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH。索玛鲁肽在2位使用了非天然氨基酸氨基异丁酸，并在20位的Lys侧链进行了PEG、γ-Glu和十八烷二酸的修饰。这些修饰使得索玛鲁肽的亲水性增强，抑制了DPP-4酶的水解，延长了生物半衰期，具有长效降低血糖、促进胰岛细胞再生和延长胃排空等多种作用。
现有的索玛鲁肽合成方法主要采用固相逐一合成直链肽，然后再合成侧链修饰基团的策略。然而，随着直链肽的延长，大量的疏水性保护基团加剧了分子间的缔合作用，导致部分活性基团被包裹，使得直链肽的偶联变得异常困难。这不仅增加了工艺中不易除去的缺陷肽，还使得投料量和反应时间增加，无法从根本上解决问题。因此，亟需一种新的合成方法来解决现有技术中存在的纯度和收率低、成本昂贵、操作步骤繁琐等问题。
本合成方法采用二肽的形式进行偶联，破坏直链肽的二级结构，解决了偶联困难的问题。具体步骤如下：
1. 固相合成主序列：采用Fmoc-Gly-Wang树脂，固相合成索玛鲁肽主序列的第1-31位氨基酸。其中，第10位Val与第11位Ser采用Fmoc-Val10-Ser11(Psi(Me，Me)pro)-OH；第20位Lys侧链采用Fmoc-Lys(X)-OH，X选自Alloc、Dde、ivdde或Mtt。当Lys20的侧链为Alloc、Dde、ivdde或Mtt时，需先脱去这些保护基团后偶联OctadecanedioicAcid(OtBu)-γ-Glu-OtBu-PEG-PEG-OH。
2. 裂解沉淀：采用裂解试剂TFA∶Thioanisole∶Anisole∶EDT∶H2O＝90∶3∶3∶2∶2，经裂解沉淀得到索玛鲁肽粗肽。
3. 纯化：索玛鲁肽粗肽经HPLC纯化，最终得到纯度大于99.5%的索玛鲁肽产品。
本合成方法的关键在于采用二肽形式进行偶联，并通过引入Fmoc-Val10-Ser11(Psi(Me，Me)pro)-OH来解决索玛鲁肽困难序列的合成问题。此外，裂解试剂的优化和纯化步骤的精细化也大大提高了产品的收率和纯度。本方法所用的缩合剂包括DIC/HOBt、HBTU/HOBT/DIEA、PyBop/HOBT/DIEA等，反应溶剂为DCM、DMF、NMP、DMSO的组合，Fmoc脱除试剂为v/v25%哌啶/DMF溶液。
与现有技术相比，本合成方法具有以下显著优势：
1. 提高纯度和收率：通过优化偶联方式和纯化步骤，解决了工艺中产生的缺陷肽问题，大大提高了产品的纯度和收率。
2. 降低成本：采用二肽形式进行偶联，减少了投料量，降低了成本，有利于放大生产。
3. 简化操作：本方法简化了操作步骤，减少了繁琐的工艺流程，更符合工业化生产的需求。
具体实施中，首先制备Fmoc-Gly-Wang树脂，然后依次偶联各氨基酸形成主序列。在偶联过程中，需特别注意第10位Val和第11位Ser的修饰，以及第20位Lys侧链的保护基团脱除和偶联。裂解步骤采用优化后的裂解试剂，确保粗肽的高效裂解。最后，通过两步HPLC纯化，得到高纯度的索玛鲁肽产品。
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