硫化氢（H2S）和次氯酸（HClO）在生物体内的生理功能中扮演着重要角色，它们的浓度变化与多种疾病的病理过程密切相关。硫化氢不仅参与调节血管舒张和心肌收缩，还能有效清除活性氧物种；而次氯酸作为重要的活性氧物种，在维持细胞内氧化还原平衡中具有关键作用。
然而，目前缺乏能够同时检测硫化氢与次氯酸的荧光探针，特别是在细胞溶酶体中的检测更为稀缺。针对这一需求，我们开发了一种新型荧光探针Lyso-HS-HA，能够同时或分别检测溶酶体内的硫化氢与次氯酸，为研究细胞内的氧化还原环境提供了有力工具。
Lyso-HS-HA的分子式为C44H43N9O7，其合成路线包括以下步骤：
1. 将化合物FP-1与水合肼在乙醇中加热回流反应，得到化合物FP-2。
2. 将FP-2溶于DMF中，依次加入1-羟基苯并三唑和碳化二亚胺，与化合物FP-3反应生成FP-4。
3. 将FP-4溶于三氯甲烷中，加入三乙胺和溴乙酰溴，反应生成FP-5。
4. 将FP-5溶于DMF中，加入碳酸钾和吗啉，生成FP-6。
5. 最终，将FP-6与NaN3反应，得到目标探针Lyso-HS-HA。
该探针的合成过程中采用了多种反应条件，包括加热回流、氮气保护和冰浴反应，确保了产物结构的稳定性与高纯度。
Lyso-HS-HA在检测硫化氢和次氯酸时表现出优异的选择性和灵敏度。当探针溶液中加入硫化氢时，荧光峰在450nm处显著增强；而在加入次氯酸时，荧光峰在580nm处逐渐升高。此外，探针对其他离子和分子的干扰表现出极强的抗干扰能力。
在可视化检测方面，Lyso-HS-HA溶液在加入硫化氢后呈现黄色，加入次氯酸后呈现深红色，同时加入两者时呈现浅红色。在紫外灯照射下，硫化氢使溶液发出蓝色荧光，次氯酸使溶液发出红色荧光，同时加入两者时发出紫色荧光。这一颜色变化特征使得探针在实时定性检测中具有重要价值。
Lyso-HS-HA在HeLa细胞中的荧光成像实验表明，探针能够对细胞外源性的硫化氢和次氯酸进行多信号组合的荧光成像。在加入硫化钠的细胞中，蓝通道观察到荧光发出；而在加入次氯酸钠的细胞中，红通道检测到荧光发出。同时加入硫化钠和次氯酸钠的细胞中，两个通道均能检测到荧光信号。
此外，Lyso-HS-HA与商业化溶酶体染料的共定位实验表明，其与溶酶体的共定位系数分别为蓝通道0.89和红通道0.86，证明了探针在溶酶体内检测硫化氢和次氯酸的有效性。
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